1、避免柱壓過高:盡管安捷倫液相色譜柱可以承受6000PSI的壓力,但過高和過大的壓力變化將縮短色譜柱的壽命。避免的方法是:當(dāng)柱壓力過高時,盡量使用較小的流速,不超過允許柱壓力的一半。當(dāng)流速較大時,應(yīng)采用流速梯度法使流速逐步到位。
2、使用手動噴油閥時,噴油閥的切換應(yīng)盡可能快。否則,超過20%的壓力沖擊將很快使色譜柱報(bào)廢。使用多列組合時,應(yīng)避免在高壓下切換列。
3、當(dāng)流動相含有緩沖鹽時,需要過濾。當(dāng)緩沖溶液放置一段時間(取決于環(huán)境溫度,夏季通常不超過48小時,冬季不超過一周)時,也應(yīng)在使用前重新過濾。
4、過濾流動相和樣品:流動相通常與水或緩沖溶液和有機(jī)溶劑混合。所有通過色譜柱的流動相均應(yīng)過濾,但實(shí)際操作應(yīng)根據(jù)具體情況而有所不同:當(dāng)有機(jī)溶劑使用色譜純度,水使用石英亞沸水或其他超純水時,如果可以確保水和有機(jī)溶劑的質(zhì)量而不造成污染,那么過濾就沒有更大的實(shí)際意義。
5、需要安裝保護(hù)柱:保護(hù)柱的功能是過濾掉流動相和樣品中的化學(xué)雜質(zhì),同時也可以有效去除流動相和樣品中的不溶物。雖然目前的色譜儀在流動相吸入口、進(jìn)樣閥后部和色譜柱兩端μM處配備了1和2以及其他孔徑不同的過濾器,但該過濾器只能去除不溶性顆粒,不能去除化學(xué)污染,因此有必要安裝保護(hù)柱,特別是在分析復(fù)雜混合物和生物樣品時,如中藥和中成藥。